APRÈN. Portal de la producció docent del professorat de la UPC

La familia de proteínas HMGB pertenece a la superfamilia de las proteínas HMG (High Mobility Group), que son las proteínas más abundantes en la cromatina después de las histonas. Las HMGB se unen al surco estrecho del ADN (ácido desoxirribonucleico) con poca o ninguna especificidad de secuencia, a partir de un motivo de unión al ADN denominado HMG-box. Existen dos dominios de HMG-box en las proteínas HMGB, las llamadas box A y box B. Cada una de ellas contiene aproximadamente 75 aminoácidos y presenta un plegamiento característico en forma de L que consta de tres hélices α. A través de estos dominios de unión al ADN, las HMGB inducen cambios estructurales en la cromatina, fomentando la unión de complejos de nucleoproteína que controlan los procesos del ADN, incluyendo la transcripción. Las proteínas HMGB están también implicadas en diferentes enfermedades y algunos tipos de cáncer, por ello su estudio estructural despierta un gran interés en el estudio de estrategias terapéuticas. Con este fin, se busca la obtención de cristales de la proteína HMGB1 con distintos oligonucleótidos. Para obtener la proteína HMGB1, mediante el empleo de técnicas de ingeniería genética se introdujo en la bacteria Escherichia coli un plásmido que contiene: el gen que expresa la proteína de interés, un gen que confiere a la bacteria resistencia a la ampicilina (para poder seleccionar las bacterias que han incorporado el plásmido) y una cola GST (Glutatión S-transferasa) que facilita la posterior purificación de la proteína. La expresión de la proteína se indujo mediante la adición de IPTG (isopropil-β-D-1-tiogalactopiranósido). Una vez expresada la proteína, ésta se ha de purificar hasta obtener muestras de elevada pureza para que se puedan cristalizar. Para ello, tras extraer la proteína del interior de la célula, se aplicaron tres técnicas cromatográficas diferentes (cromatografía de afinidad, de intercambio catiónico y de exclusión molecular). A continuación se realizaron ensayos cristalográficos de distintos complejos HMGB1-ADN con secuencias ricas en adenina y timina mediante la técnica de difusión de vapor en gota colgante. Para encontrar condiciones óptimas de cristalización, se ensayaron distintas variables (relación proteína-ADN, pH, sales, etc.). Tras la obtención de cristales, éstos se pescaron y se congelaron en nitrógeno líquido. Posteriormente se procedió a su difracción mediante rayos X en el sincrotrón ALBA. Los datos obtenidos se procesaron mediante diferentes programas de ordenador para la resolución de la estructura. El método de resolución a emplear fue el de reemplazamiento molecular. A través del análisis de los diagramas de difracción obtenidos se ha resuelto la estructura del ADN, aunque se requiere la obtención de un cristal con más orden para poder precisar la posición de la proteína.

La publicación de la primera estructura cristalográfica de resolución atómica de un miembro de la familia de los receptores acoplados a proteínas G (GPCR) como es la Rodopsina Bovina (Rho) (1)marcó el comienzo de los estudios sobre la relación entre la actividad biológica y la estructura de estas proteínas (1,2). Si bien se han llevado a cabo numerosos estudios de difracción de rayos X de las estructuras de GPCRs desde ese momento, dada la dificultad de cristalización de este tipo de proteínas, aun no se dispone hoy en día de la estructura tridimensional a nivel atómico de un gran número de GPCRs, entre ellos del receptor de Neuroquinina (NK1-R). Sin embargo, dado que los GPCRs comparten una estructura de 7 hélices de transmembrana enlazadas por loops se han podido producir modelos de diferentes receptores de membrana por homología de secuencia (2; 3; 4). El receptor NKI-R está involucrado en muchos eventos celulares de inflamación, dolor, trastornos neuronales, del sistema digestivo y del sistema inmune, incluyendo cáncer (4), un modelo 3D de este receptor puede ser utilizado para conocer con más detalle los principios básicos moleculares de su actividad biológica y ser utilizado en el diseño racional de fármacos. En el presente trabajo se ha obtenido un modelo del receptor NK1R mediante modelización por homología de secuencia (HM) y dinámica molecular (DM), utilizando la estructura 3D de alta resolución (1.8 Å) del receptor delta-opioide presentado el 2014. El modelo final fue utilizado para el anclaje de cinco antagonistas no peptídicos, confirmando las interacciones con ciertos residuos presentes en el sitio activo, en concordancia con estudios de mutagénesis dirigida. Estos resultados han permitido definir un farmacóforo 3D que cumplió con al menos dos puntos, al evaluar el docking con 5 diferentes antagonistas no peptídicos, conocidos por su eficacia terapéutica y su alta afinidad por el receptor. El modelo refinado del receptor NK1-R sugiere algunos residuos claves en el sitio de unión, de los cuales no se tiene referencia en estudios previos de mutagénesis dirigida, así mismo el farmacóforo obtenido presenta características útiles para el diseño racional de fármacos esto puede significar nuevos retos para futuras investigaciones. Los resultados y conclusiones obtenidos se detallan en las secciones respectivas del presente informe.

Regenerative medicine integrates different biomedical approaches to restore normal function in damaged tissues using a combination of cell/molecular biology and materials engineering. One of the most promising alternatives is to design a biodegradable and porous scaffold decorated with inductive factors that promote cell colonization and proliferation. In this context, an appropriate processing of the polymer is required in order to obtain a scaffold that acts as a support for tissue growth. In this work is developed a new route for the preparation of porous matrices with appropriate physico-chemical and biological properties using supercritical fluid technology. In special, we investigate the PLA polymer to obtain 3D porous scaffolds and its decoration with bacterial inclusion bodies. IB's have been revealed as adhesive, mechanically and biocompatible protein materials that can be used to favour cell colonization and proliferation when used to decorated flat surfaces. The synthesis of new matrices with improved properties concerning porosity, interconnectivity and mechanical properties has been possible using supercritical fluid technology for the processing of PLA. In addition, the decoration of PLA porous scaffolds with bacterial inclusion bodies promotes cell adhesion and colonization. Inclusion bodies do not result toxic to the cells and contrarily improve cell proliferation on the surface. The hybrid polymeric-IB's porous matrices obtained for the first time is this work are promising platforms to be used in bone tissue engineering.

La astaxantina es un carotenoide que se encuentra de forma natural en especies del medio marino. En los últimos años ha suscitado un gran interés por parte de la comunidad científica, gracias a la evidencia creciente por diferentes estudios in vitro, in vivo en animales y ensayos clínicos en humanos, que sugieren que la astaxantina tiene un potencial de efectos promotores sobre la salud, en la prevención y tratamiento de diversas enfermedades. La aplicación de la molécula se ha consolidado en diferentes sectores, como en alimentación animal, nutracéutica o cosmética, pero sobretodo, su interés radica en el desarrollo dentro de la industria farmacéutica. En el presente trabajo se ha diseñado un proceso de producción a partir de la microalga Haematococcus pluvialis, que sintetiza la molécula como un mecanismo de defensa propio. Se han descrito las principales etapas y equipos, así como, mediante un estudio económico se ha demostrado la viabilidad del proceso.

El principal objetivo de un laboratorio es producir resultados fiables, por lo que ésta es la actividad que debe recibir mayor atención. La garantía de calidad de estos resultados no es una carga adicional ni una actividad suplementaria que pueda tomarse o dejarse, sino que constituye uno de los instrumentos fundamentales de administración para el director y su personal, con miras a alcanzar los objetivos fijados. Para ello se ha realizado el estudio de varios puntos, desde las instalaciones necesarias hasta los controles de calidad externos que se deben realizar, con el fin de poder implementar este sistema de garantía de calidad en un laboratorio. A lo largo de esta memoria se ha realizado el estudio de los diferentes puntos clave que se deben tener en cuenta, a nivel de laboratorio, para poder implementar este sistema de garantía de calidad. Lo primero es saber que condiciones deben cumplir las instalaciones en las cuales queremos implementar este sistema de garantía de calidad. Existen normativas específicas, sobretodo a nivel de microbiología, que deben ser cumplidas. También el personal que forma parte del laboratorio debe estar evaluado y capacitado para poder asegurar la fiabilidad de los resultados emitidos. Se han tenido en cuenta puntos más técnicos. Se ha explicado la importancia de la calibración/verificación de los equipos del laboratorio, como establecer criterios de aceptación, que parámetros evaluar en función de la categoría de cada uno y como realizar un planning de calibración. También se ha desarrollado un procedimiento para caracterizar medios isotermos que implicará un ahorro considerable de los gastos de calibración del laboratorio. Se han validado métodos, tanto de Biología molecular como ELISA, para posteriormente realizar ensayos en rutina en el laboratorio. Los resultados obtenidos en ambas validaciones han sido satisfactorios, cumpliendo en todos los puntos estudiados, los criterios de calidad previamente establecidos. Durante esta validación también se han marcado los controles de calidad internos que se deberían hacer, de forma frecuente, en cada uno de los métodos. Relacionado con los controles de calidad también se ha descrito como realizar controles de calidad externos, como seleccionarlos y evaluarlos.

Recientemente se han logrado grandes avances en la determinación de la estructura y función de los receptores acoplados a proteínas G (GPCR's). Los GPCR´s constituyen gran familia de proteína integrales de membrana y se encuentran implicados en una gran variedad de procesos fisiológicos como la respuesta a hormonas y neurotransmisores, así como también son centrales en los sistemas sensoriales mediando las respuestas en los sentidos de la vista, olfato y el gusto. Entre ellos se encuentra la familia de los receptores muscarínicos de acetilcolina, compuesta por 5 subtipos de receptores (M1-M5), los cuales modulan la mayor parte de las acciones del neurotransmisor acetilcolina en el sistema nervioso central y en el sistema nervioso periférico. Los receptores muscarínicos han jugado un papel muy relevante en la compresión del funcionamiento de la neurotransmisión. En este trabajo nos centraremos únicamente en los receptores M1 y M3 debido a su potencial participación en el mecanismo molecular de la enfermedad de Alzheimer Hasta ahora se ha visto que estos receptores se encuentran implicados en varias patologías del sistema nervioso central, ya que modulan la señalización de diferentes sistemas neurotransmisores. Estos sistemas se ven alterados como en el caso de la enfermedad de Alzheimer, donde se ha visto que modulan la degradación de la APP (proteína precursora de amiloide) por la α-secretasa y de esta forma evitan la formación de las placas neuríticas conocidas como β-amiloides (Aβ) características de esta enfermedad. Además se ha sugerido que como resultado de su interacción con la proteína tau, pueden jugar un papel muy relevante en la pérdida de neuronas colinérgicas a través de un mecanismo que involucra la interacción intracelular y extracelular de la proteína tau con los receptores muscarínicos M1/M3 presentes en este tipo de neuronas. El objetivo de este trabajo es comprender y analizar detalladamente las propiedades biológicas y bioquímicas de las diferentes isoformas de la proteína tau (ya sean fragmentos o la proteína completa soluble) así como las posibles interacciones que puedan tener con los receptores muscarínicos en relación a su implicación con el Alzheimer. Para ello, el principal logro ha sido optimizar las metodologías de expresión y purificación de la proteína tau. Ello ha permitido, por primera vez en nuestro grupo, la obtención de la proteína tau purificada, así como también la obtención de los receptores muscarínicos mediante su expresión en líneas celulares apropiadas.

The development and improvement of non-viral vectors on genetic engineering has been the subject of study of many researchers due to its advantages as compared to its viral counterparts. Among the numerous studied non-viral vectors, hydroxyapatite particles (HAP) have been traditionally used for genetic transfection assays due to its strong interactions with nucleic acids, low cost, low toxicity, high biocompatibility and ease of fabrication. Amid employed vector synthesis techniques, chemical co-precipitation is most popular. It consists of apatite crystal formation as a consequence of precipitation reactions brought upon by addition of a phosphate source to an aqueous calcium solution. DNA adsorption occurs on the surface of the generated apatite material. However attractive, chemical co-precipitation presents various shortcomings such as poor morphology control, poor particles size control, aggregates formation and DNA exposure. All these characteristics have been pointed out by several authors as some of the factors contributing and leading to low transfection levels. Within this context, the present study exhibits the successful encapsulation of DNA with HAP nanoparticles produced by a synthesis protocol based on chemical precipitation. The obtained nanocapsules showed a primarily spherical morphology and good dispersion. Moreover, the protecting effect of HAP capsule material upon DNA integrity was confirmed by endonucleases attack studies as well as genetic material liberation under acidic biomimetic environment. Finally, the transfection viability of the synthesized nanoparticles was successfully evaluated by means of bacterial transformation under in-vitro conditions, thus demonstrating the biotechnological potential as non-viral vectors.

La neutropenia es un estado clínico provocado por un conteo bajo de neutrófilos. Esta alteración se da sobre todo por la quimioterapia mielosupresora. El factor estimulante de colonias de granulocitos aumenta el conteo de neutrófilos. En el presente trabajo se realiza un estudio bibliográfico exhaustivo sobre de los productos farmacéuticos del factor estimulante de colonias de granulocitos recombinante humano (rHuG-CSF). Se analiza sus propiedades farmacológicas, sus indicaciones, contraindicaciones y se escoge la mejor opción para la producción en el mercado Español. Se describe el proceso de producción del principio activo de PEGFilgrastim, que se ha determinado que va a ser la forma a producir. Se escoge esta forma porque se puede producir en E. coli y presenta una vida media en sangre superior a la forma no pegilada. Se dimensionan los equipos necesarios en el proceso de producción, se propone una línea de actuación de los residuos generados en la planta y se realiza un estudio económico para determinar la viabilidad de la planta.

La capacidad de adhesión de las bacterias probióticas a las células epiteliales es una de las características más importantes para decidir si la bacteria es apta para ser designada como probiótico y emplearse en la alimentación. La determinación de la hidrofobicidad a hidrocarburos se cree que podría resultar un método de pre-­screening de bacterias candidatas a presentar buenas propiedades de adhesión, método más rápido, con menor inversión de equipos y material y mucho más económico. Asimismo, se cree que la adhesión está fuertemente relacionada con la presencia de proteínas de membrana llamadas S-­layer. Se ha trabajado con una colección de 58 cepas pertenecientes a diferentes especies de los géneros Lactobacillus y Bifidobacterium, de los cuales se han obtenido buenos porcentajes de hidrofobicidad para L.gasseri, donde se ha logrado demostrar la presencia de proteínas de tipo S-­layer, en este caso APF2, L.oris, B.bifidum, B.longum infantis (CECT7210) y dos cepas de B.longum longum y B.breve que destacan sobre las demás cepas de su especie, coincidiendo con el hecho de que se encuentran más alejadas filogenéticamente dentro de los miembros de su misma especie. Además, se observa como la especie L.casei presenta diferencias significativas en la hidrofobicidad cuando el crecimiento del cultivo se lleva a cabo en condiciones aerobias o anaerobias. Se seleccionan estas cepas para ver si el uso de distintos prebióticos como fuente de carbono principal produce efectos en la hidrofobicidad, usando como valor de referencia un medio mínimo de Norris, que se acerca más a las condiciones que se encuentran en el intestino. Se aprecia que la influencia de los prebióticos suele ser positiva, especialmente con el uso del prebiótico 1, aunque no existe un patrón de comportamiento extensible para todas las bacterias, sino que depende de las especies o, incluso, de la propia cepa. Se demuestra la implicación de las proteínas de membrana tipo S-­layer en la hidrofobicidad, a partir de un tratamiento con LiCl, agente desnaturalizante, obteniéndose un descenso de la hidrofobicidad en cepas como L. gasseri y L. casei hasta niveles del 26% y 66% en condiciones de aerobiosis, donde se produce una mayor expresión. El género Bifidobacterium, por el contrario, no parece tener efectos destacables, pero si se ha podido establecer una relación de la hidrofobicidad con la formación de agregados, siendo más elevado el porcentaje de hidrofobicidad cuanto mayor sea la presencia de agregados al observar las bacterias mediante microscopía óptica. Se puede decir, por tanto, que la hidrofobicidad es un buen método para seleccionar bacterias con altas probabilidades de presentar buena capacidad de adhesión.

There are still many question open to completely understand the structure-activity relationships of G-protein coupled receptors. Issues like the actual mapping of the binding site of different subtypes, as well as the mechanism of activation are poorly understood [1]. Accordingly, further studies on the structure-activity relationships are necessary. In this regard, only a few 3D structures are available from X-ray diffraction studies. Computational studies can complement this information through the construction of reliable 3D models. The goal of the present work is to evaluate the effect of using different ligands to obtain reliable models of the three-dimensional structure of a G-protein coupled receptor using a specific template. Specifically, we have constructed in the present work a three dimensional model of the M3 muscarinic receptor by homology modelling, using the X-ray structure of M2 muscarinic acetylcholine receptor as template and the sequence analyses of muscarinic acetylcholine receptor family. Furthermore, we have studied the effect of the ligand used in the modelling process. For this purpose three models of the receptor were built, including one without ligand and two models with the selective antagonists tiotropium and N-Methylscopolamine, respectively docked into the orthosteric binding site. The constructed models were refined using molecular dynamic calculations to analyze the effect of ligand refinement process and to derive significant conformational information. Based on the analysis of the refined models done through the calculations of RMSD, RMSF, visualization of the structures and comparison between the refined models and the crystal structure of M3 muscarinic receptor, the addition of a ligand in construction of homology model (and the subsequent refinement process) stabilize the structure. Furthermore, the similarities in the structure conformations of both refined models of M3 muscarinic-ligand complexes and the crystal structure of the M3 muscarinic receptors, suggest that the methodology used in this study can be used in prediction of 3D structure prediction GPCR in the absence of crystal structures.

El ácido γ-poliglutámico es un polímero inusual que acontece de forma natural, aniónico, soluble en agua, biodegradable, comestible y que no resulta tóxico ni para el ser humano ni para el ambiente Diferentes cepas de bacterias del género Bacillus son capaces de producir el γ-PGA, ya sea como material viscoso extracelular o como componente capsular. En termino industrial, estas cepas han sido las más utilizadas y por ende, las más estudiadas hasta el momento. La mayor parte de los estudios llevados a cabo hasta la fecha han estado orientados a determinar los requerimientos nutricionales para el adecuado crecimiento celular, así como mejorar la productividad de γ-PGA y la variación en la composición de su estructura, en lo referente al contenido de ácido L- y D-glutámico. Una de las principales limitantes que han encontrado los estudios previos sobre producción de ácido poliglutámico en medio líquido mediante fermentación sumergida es la dificultad del escalamiento, muy probablemente debido a la reducción en la tasa de transferencia de oxígeno al aumentar los volúmenes de cultivo, lo que conlleva a rendimientos pobres o a la generación de un polímero de bajo peso molecular. La presente investigación busca estudiar la producción de ácido γ- poliglutámico por Bacillus licheniformis ATCC9945a y el efecto que tiene sobre el rendimiento y estructura del producto factores propios de la ingeniería química como lo son la presión y la intensidad de agitación, particularmente desde la perspectiva de su efecto sobre la tasa de transferencia de oxígeno. Para cumplir con dicho objetivo, se diseñó un biorreactor que permitió realizar fermentaciones a presión positiva de hasta 4 bar absolutos. Los resultados obtenidos y reportados en esta investigación sugieren queBacillus licheniformis ATCC9945a es capaz de crecer eficientemente a presiones de hasta 2,42 bar relativos, no viéndose afectado, desde el punto de vista de viabilidad, por el incremento de la variable presión de fermentación. De igual manera, la presión de fermentación afecta de manera significativa la productividad de Bacillus licheniformis ATCC9945a en γ-PGA. Así mismo, la presión de fermentación modifica la composición enantiomérica del γ-PGA.

Las actividades relacionadas con el ADN como la transcripción, replicación, recombinación y reparación implican cambios en la estructura del ADN y en la organización de la cromatina. Estos cambios estructurales dependen de su interacción con proteínas. Las proteínas HMGA1 (High Mobility Group A1) son miembros de una superfamilia de proteínas de baja masa molecular, se encuentran en el núcleo de las células y modifican la conformación espacial del ADN. Actúan como factores de transcripción arquitectónicos regulando la expresión de numerosos genes. De esta manera influyen en muchos procesos celulares como el crecimiento, el desarrollo embrionario, la diferenciación, la proliferación y la muerte celular. Por otro lado, este grupo de proteínas está relacionado con algunos procesos que afectan negativamente el desarrollo normal de la célula como la integración de los retrovirus en la cromatina, la inducción de la transformación neoplásica y la promoción de la metástasis, participando así en procesos celulares patológicos como la obesidad, la diabetes, la arteriosclerosis y el cáncer. Los genes de la proteína HMGA1a humana son altamente expresados durante la embriogénesis y prácticamente en todos los cánceres agresivos humanos. Las interacciones HMGA1a-ADN se dan a través de los motivos de unión al ADN denominados AT-hooks, los cuales se unen preferentemente a regiones ricas en AT (adeninas y timinas), en el surco estrecho del ADN. Las proteínas HMGA1a cuentan con tres motivos AT-hooks. Asimismo, se han encontrado una variedad de moléculas pequeñas, naturales o sintéticas, que interaccionan con secuencias de ADN en el mismo sitio de reconocimiento que las proteínas HMGA1a, es decir, drogas que preferentemente se unen al surco estrecho del ADN en regiones ricas en adenina y timina. Para entender mejor el mecanismo por el cual estas proteínas y fármacos se unen al surco estrecho del ADN es necesario determinar la estructura tridimensional de sus complejos con ADN. Con ello, es posible proporcionar información valiosa para el estudio de las patologías relacionadas con la sobreexpresión de la HMGA1a y el diseño de nuevos tipos de agentes terapéuticos.

Aunque la fisiopatología de la depresión aún no está completamente clara, se sabe que implica perturbaciones en la transmisión monoaminérgica en el cerebro. Los actuales fármacos antidepresivos limitan su eficacia terapéutica a una serie de pacientes, y están ligados a efectos secundarios serios. Con miras a ampliar los agentes terapéuticos, los estudios recientes sugieren que la existencia de dimerización entre los receptores de galanina (GalR1) y serotonina (5HT-1A), pueden ser relevantes en los trastornos del estado de ánimo. A nivel fisiológico la galanina es coexpresada con la serotonina, participando en sus procesos de modulación, mediante receptores acoplados a proteínas G entre los cuales se destaca el receptor GalR1 y sus rutas de señalización intracelular (Gi/0). En este trabajo se han co-expresado el GalR1 y el 5HT-1A en células HEK 293T para evaluar su posible interacción mediante la técnica de FRET. Los resultados obtenidos confirman la heterodimerización entre los dos receptores, presentando eficiencias de FRET de alrededor del 48,5% cuando las células fueron transfectadas con 1μg de 5HT-1A-pCFP y variando la cantidad de GalR1-pYFP (0,5μg-4μg). Así mismo se observó una disminución en la eficiencia (≈42%) al someter a las células co-transfectadas a concentraciones de 200μM, 300μM y 400μM de ZnCl2. Debido a su gran importancia como diana terapéutica, se purificó el receptor GalR1 mediante cromatografía de inmunoafinidad utilizando los detergentes DM, CHAPS y OGP como eluyentes y su estado conformacional fue evaluado usando espectroscopia de fluorescencia (fluorescencia intrínseca del triptófano). A pesar de la presencia del receptor y la evidencia de un red-shift en todas las muestras, la proteína purificada con DM mostró un desplazamiento más lento y gradual en la λMAX de emisión (1nm-2nm) tras la adición de DTT (200μM-1500μM) y urea (8mM) que los otros detergentes, sugiriendo que el DM proporciona un ambiente más flexible y por ende una mayor estabilidad al receptor. Por otra parte, mediante la sobre-expresión en E. coli de la proteína quimera transducina (Gαt/i1) como modelo, se establecieron las condiciones de inducción óptimas (IPTG 30μM, 16h at 23ºC) y se continuó con su exitoso aislamiento y purificación mediante cromatografía de afinidad (prodominio de subtilisina) con el objetivo principal de utilizar estas técnicas como métodos estandarizados y poder expresar, aislar y purificar la subunidad α de la proteína Gi1 mediante la clonación su gen en el vector PG58-prodominio para llevar a cabo, en futuras investigaciones, ensayos funcionales (galanina-GALR1-Gi).

Qualsevol avió de passatgers produeix residus tants sòlids com líquids, procedents de les sentines, que són emmagatzemats en un dipòsit aïllat de l'avió. La part líquida d'aquests residus, a la que anomenem aigües residuals, és, essencialment, el líquid procedent dels lavabos. L'aigua residual generada a l'Aeroport del Prat (Barcelona) prové de dos destins diferents. Pràcticament la totalitat de les aigües residuals (uns 1.000m3/dia) prové de les terminals i edificis annexes. Per altra banda, els avions descarreguen les aigües procedents de les seves sentines (uns 10m3/dia) en camions cisterna que, alhora, s'aboquen a la xarxa de sanejament. La mescla dels dos abocaments s'impulsa a l'EDAR del Prat. La càrrega contaminant de l'aigua residual de les terminals és perfectament normal i, de per si, es podria portar a l'EDAR sense cap tractament previ. Tanmateix, la càrrega contaminant de l'aigua residual provinent de les sentines és tant elevada que, encara que es dilueixi amb la resta de l'aigua residual de l'aeroport, l'aigua resultant excedeix en alguns paràmetres els límits autoritzats pel reglament metropolità (especialment l'Amoni i el NKT). Aqualogy Soluciones Industriales és una empresa que pertany al grup Agbar. Aqualogy S.I. desenvolupa la seva activitat en el sector industrial i ofereix serveis relacionats amb el cicle integral de l'aigua. Dins de les seves activitats principals destaquen l'assistència tècnica a indústries en el marc del tractament d'aigües, ja siguin de procés o residuals, el disseny i construcció d'instal·lacions així com també el manteniment i operacions de les mateixes. Aqualgoy Soluciones Industriales és l'empresa encarregada de dur a terme la implantació i posada en marxa de la planta de tractament d'aigües procedents de les sentines dels avions a l'Aeroport del Prat. Així doncs, aquest projecte queda emmarcat en les tasques i activitats de posada en marxa i entrega a client de la planta de l'Aeroport del Prat per part d'Aqualgoy S.I. La finalitat d'aquest treball és la d'estudiar la tecnologia implantada, estudi de la planta de tractament i proposta de tractaments alternatius, així com també la recerca bibliogràfica i síntesi d'informació sobre els diferents tractaments d'aigües residuals industrials.

The objective of this research is to recover yeast protein from pot ale, a whisky by-product. Different yeast disruption methods were tested: enzymatic disruption, glass beads, the commercial reagent Y-PER plus, autolysis, sonication, homogenization and combination of mechanical and non-mechanical methods. This work was focused on the enzymatic disruption and combined method; the effect of different enzymes, enzyme concentration and time on protein recovery was studied. The optimal extraction method was the pot ale incubation with 1000 ppm Rohalase® BX and 0.015M EDTA followed by homogenization at 500 bars, which increases the protein recovery yield up to 50% compared with homogenization. The hydrolysis of yeast in pot ale permits the recovery of high quality proteins, which can be used as food or feed grade.

Se ha estudiado el interferón α, sus aplicaciones como fármaco en la lucha contra enfermedades como la hepatitis B y C, o la leucemia mieloide crónica, y su pegilación para la mejora de sus propiedades farmacocinéticas y farmacodiámicas. Se ha estimado las necesidades de fármaco para el mercado español y se ha diseñado una planta de producción (para satisfacer esa demanda) de peginterferón α-2a recombinante, usando, para su producción, Escherichia coli cultivada en biorreactores de alta densidad celular, y empleando un proceso de separación y purificación basado en el descrito por K. R. Babu y colaboradores (2000), pero en continuo. Además se ha diseñado el proceso de pegilación, también en continuo, junto con sus etapas de purificación basándose en los experimentos de P. Bailon (2001). Posteriormente se ha realizado un estudio económico, mediante el cual se ha demostrado la viabilidad del proceso diseñado.

La hormona de crecimiento humano es uno de los primeros fármacos producidos de forma recombinante. El interés por la fabricación de este fármaco renace debido a la caducidad de las patentes que protegen a este producto. Es por tanto una gran oportunidad de negocio hacerse un hueco en el mercado de la producción de el principio activo de forma que se pueda comercializar como principio activo para genéricos. En este trabajo se muestra el proceso para la producción recombinante del principio activo y la posterior purificación, se realiza el diseño de los equipos y se calcula de forma estimada el coste de producción demostrando la viabilidad económica del proceso. Además también se aporta una posible solución cualitativa para el tratamiento de los residuos generados en la planta conforme con la normativa vigente tanto del Gobierno de España como de la Generalitat de Catalunya.